将物体放大200万倍,电子显微镜工作原理揭秘!

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可以将物体放大200万倍,能观察到蛋白质结构,电子显微镜的工作原理是什么? 17世纪60年代,一位荷兰商人安东尼·范·列文虎克磨了500多片玻璃,成功改进了显微镜,让它的放大倍数达到500倍。 在伽利略时代,显微镜

  可以将物体放大200万倍,能观察到蛋白质结构,电子显微镜的工作原理是什么?

  17世纪60年代,一位荷兰商人安东尼·范·列文虎克磨了500多片玻璃,成功改进了显微镜,让它的放大倍数达到500倍。

  在伽利略时代,显微镜只能看虫子,而列文虎克时代的显微镜,已经可以看清楚单细胞生物了,而他也被誉为近代生物学之父。

  可是,现代生物学光靠光学显微镜是远远不够的。

  1953年沃森和克里克使用X光衍射,发现了DNA的双螺旋结构,这是分子生物学的开端。但是再往下,蛋白质的内部结构只靠X光衍射就行不通了,光学显微镜更观察不了,必须上电子显微镜,它的放大倍数能达到200万倍,甚至可以看清金箔表面的原子排布。这是怎么做到的?

  这是一台透射电子显微镜,它的结构并不复杂,有点像你家里仓库拐角落灰的黑白电视机。在显微镜的最上方有一个电子发射枪,其核心是一根钨合金针,加热这根针丝,会有电子溢出。这时在钨针上下加一个强电场,方向朝上,电子会被这个强电场给提取出来,穿过一个小孔进而形成电子束。

  初始的电子束太分散了,而且能量也不足,需要经过多组电磁透镜来让这根电子束变细,加快电子运动的速度。

  电磁透镜主要用线圈来制作,电场来给电子加速,而线圈通电后的磁场来精准约束电子的轨迹。就这样,电子束越来越细、能量越来越高,到达要观察的物体时,电子速度已经接近70%光速。

  整个电子束约束和加速的过程,必须要在真空环境下进行,否则电子容易被空气中的氮氧碳等元素散射,最终无法成像。

  看到这里,不知道你有没有恍然大悟,这不就是阴极射线管吗?没错,但是阴极射线管里的电子速度不够快,也不够细。透射电子显微镜里的线圈产生磁场和电场强度,要比黑白电视机上的大多了。

  在透射电子显微镜中,穿透极薄样品的电子可直接撞击荧光屏发出可见光,或由高灵敏度的CCD相机捕获转化为数字信号。在扫描电子显微镜中,聚焦极细的电子束在样品表面逐点扫描,激发出的二次电子或散射电子信号被专门探测器接收,其强度变化被转换为屏幕上的像素亮度,构建出样品表面的立体形貌图。

  在此期间需要对二次电子进行反向操作,同样用磁场和电场把照射完的电子束给放大,一般是5万倍,这样探测器才能接收到,进而绘制出图片。

  为什么要用电子呢?

  传统显微镜利用可见光的衍射来观察物体,但是可见光有一个波长范围。人眼可观察到的可见光范围是380~750纳米,这意味着,它能清楚观察到的事物尺寸不能小于380纳米。就好比一个尺子,最小刻度是1毫米,你不能拿它来量0.1毫米的物体,这是量不准的。

  X光的波长就比较短了,只有0.01~10纳米,因此它的穿透性很强,可以用它来制造精确度更高的显微镜。

  高能电子的波长比X光还要短,电子虽然是一种粒子,但是它足够小,运动足够快,在微观世界它的波粒二象性非常明显。根据德布罗意物质波理论,高速运动的电子波长会很短,在10万伏特电压加速下,电子波长仅为约0.004纳米,这比X光还要精准,如果速度再增加,精准度还会提高。

  太精准了也有麻烦,被观察物体要是有微小的运动,那最终的成像也是不清晰的。为什么会动呢?放一段线粒体里的DNA序列,它又没有生命,怎么动?

  这就要从温度上解释了,温度的微观意义是粒子的不规则运动,这种运动对透射电子显微镜的观察是有影响的。因此温度越低,观测样品内部的分子运动幅度就越小,透射电子显微镜成像就越清晰。

  近些年生物学的大发展,主要就靠冷冻电镜,它的原理是把生物样品冷冻到接近绝对零度,然后再用透射电子线显微镜去观察,这样就看的更加准了。

  从1931年鲁斯卡研制出首台原型镜至今,电子显微镜已走过近百年辉煌历程。它不仅仅是复杂仪器的集合,更是人类对微观世界无尽好奇与不懈探索的结晶。每一次电子束穿透样品或掠过表面,都在无声地诉说着物质内在的秩序与美。它拓展了认知疆界,架起了从宏观世界通往原子宇宙的坚实桥梁。

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